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劇情主要是一隻名為紫悅（Twilight Sparkle）的獨角獸小馬為執行小馬統治者宇宙公主（Princess Celestia）的任務而前往小馬鎮（Ponyville）學習友誼的知識。
在那裡，與另外五隻小馬——蘋果嘉兒（Applejack）、珍奇（Rarity）、柔柔（Fluttershy）、雲寶（Rainbow Dash）與碧琪（Pinkie Pie）——成為莫逆之交。
這六位小馬每隻都代表著友誼的其中一個要素，在和諧水晶（Elements of Harmony）中各扮演重要角色，不僅要於小馬國四處冒險、扶善懲惡，更需在她們間的互動與衝突中找出不同友誼問題的最佳解決方案。
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